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雙熒光素酶報告系統(tǒng)(Dual-luciferase reporter system)
利用熒光素酶與底物結(jié)合發(fā)生化學發(fā)光發(fā)光反應的特性,把感興趣的基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構(gòu)成熒光素酶報告質(zhì)粒。然后轉(zhuǎn)染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素
瞬時轉(zhuǎn)染(Transient transfection)
瞬時轉(zhuǎn)染(transient transfection)是指將DNA導入真核細胞的方式之一。在瞬時轉(zhuǎn)染中,重組DNA導入感染性強的細胞系以獲得目的基因暫時但高水平的表達。轉(zhuǎn)染的DNA不必整合到宿主染色體,可在比穩(wěn)定轉(zhuǎn)染較短時間內(nèi)收獲轉(zhuǎn)染的細
外源基因在細胞中表達可分為兩大類,一類是瞬時表達,一類是穩(wěn)定表達(**表達)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,雖然可以達到高水平的水平,但通常只持續(xù)幾天。后者外源DNA整合到宿主細胞染色體上,使宿主細胞可長期表達目的基因。建立穩(wěn)
透射電鏡(transmission electron microscope,TEM)
1932年Ruska發(fā)明了以電子束為光源的透射電子顯微鏡,電子顯微鏡與光學顯微鏡的成像原理基本一樣,所不同的是前者用電子束作光源,用電磁場作透鏡。另外,由于電子束的穿透力很弱,因此用于電鏡的標本須制成厚度約50nm左右的超薄切片。目前TEM
成骨誘導,是指來自植床周邊宿主結(jié)締組織中的可誘導成骨前體細胞,在誘導因子的作用下可被誘導定向產(chǎn)生骨原細胞、成骨細胞。
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