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成骨誘導(dǎo)
來源: | 作者:1 | 發(fā)布時間: 1752天前 | 746 次瀏覽 | 分享到:
成骨誘導(dǎo)，是指來自植床周邊宿主結(jié)締組織中的可誘導(dǎo)成骨前體細(xì)胞，在誘導(dǎo)因子的作用下可被誘導(dǎo)定向產(chǎn)生骨原細(xì)胞、成骨細(xì)胞。

工作原理：

成骨誘導(dǎo)，是指來自植床周邊宿主結(jié)締組織中的可誘導(dǎo)成骨前體細(xì)胞，在誘導(dǎo)因子的作用下可被誘導(dǎo)定向產(chǎn)生骨原細(xì)胞、成骨細(xì)胞。
操作方法和步驟：
1.原代的MSCs分離后，置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每2-3天換液或傳代；
2.建議使用低代次的MSCs（<8代，隨著傳代后代次的增加，多向潛能的能力也逐漸降低）。當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到60-80%時，用0.25%Trypsin-EDTA進(jìn)行消化進(jìn)行傳代。
3.收集細(xì)胞，按照5×103cells/cm2的細(xì)胞密度接種在預(yù)先用明膠包被的六孔板中，每孔培養(yǎng)基2 ml，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
4.待細(xì)胞融合度達(dá)到60-70%，開始誘導(dǎo)，小心棄去培養(yǎng)基，并小心沿壁加入37℃預(yù)熱的成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基；
5.每隔3天更換新鮮預(yù)熱過成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基；
6.誘導(dǎo)2周后，為盡可能避免成骨細(xì)胞卷邊，脫落，每3天全換液更換為每2天半量換液，直至誘導(dǎo)出現(xiàn)大量礦化結(jié)節(jié)。

成骨檢測方法：

1.ALP活性檢測；
2.茜素紅染色（鈣結(jié)節(jié)染色）。

客戶提供：
1.成骨前體細(xì)胞；2.成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基。

*終交付：

實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)報(bào)告單。

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