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染色質(zhì)免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation, ChIP)
染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物,并將其隨機(jī)切斷為一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小 片段,然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體,特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段,通過對(duì)目的片斷的純化與檢測(cè),從而獲得蛋 白質(zhì)與DNA相
定點(diǎn)突變( Site-specific mutagenesis)
定點(diǎn)突變是指通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因組,也可以是質(zhì)粒)中引入所需變化(通常是表征有利方向的變化),包括堿基的添加、刪除、點(diǎn)突變等。定點(diǎn)突變能迅速、高效的提高DNA所表達(dá)的目的蛋白的性狀及表征,是基因研究
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization, FISH )
FISH的基本原理是用用已知的標(biāo)記單鏈核酸為探針,按照堿基互補(bǔ)的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進(jìn)行異性結(jié)合,形成可被檢測(cè)的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列,因而可以探針直接與染色體進(jìn)行雜交從而將特定的基因在
基因克隆/載體構(gòu)建(Gene clone/vector construction )
基因是細(xì)胞內(nèi)DNA分子上具有遺傳效應(yīng)的特定核苷酸序列的總稱,是具有遺傳效應(yīng)的DNA分子片段?;蚩寺『洼d體構(gòu)建是基因工程操作的主要組成部分。
單核苷酸多態(tài)分析(Single Nucleotide Polymorphism, SNP)
單核苷酸多態(tài)性分析全稱Single Nucleotide Polymorphisms,是指在基因組上單個(gè)核苷酸的變異,形成的遺傳標(biāo)記,其數(shù)量很多,多態(tài)性豐富。SNP在人類基因組中的發(fā)生頻率比較高,大約平均每1000個(gè)堿基中就有一個(gè)多態(tài)位點(diǎn)。
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