免費服務(wù)熱線
400-8705-465
背景知識 :
DNA甲基化(DNA
methylation)為DNA化學(xué)修飾的一種形式,能夠在不改變DNA序列的前提下,改變遺傳表現(xiàn)。所謂DNA甲基化是指在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶的作用下,在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5號碳位共價鍵結(jié)合一個甲基基團(tuán)。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、DNA構(gòu)象、DNA穩(wěn)定性及DNA與蛋白質(zhì)相互作用方式的改變,從而控制基因表達(dá)。
主要檢測方法:
亞硫酸氫鈉測序法 (Bisulfite Genomic Sequencing PCR, BSP )
用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,則未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變。隨后設(shè)計BSP引物進(jìn)行PCR,在擴增過程中尿嘧啶全部轉(zhuǎn)化為胸腺嘧啶,*后對PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序就可以判斷CpG位點是否發(fā)生甲基化稱為BSP-直接測序方法。將PCR產(chǎn)物克隆至載體后進(jìn)行測序,可以提高測序成功率,這種方法稱為BSP-克隆測序法。
甲基化特異性的PCR (Methylation Specific PCR, MSP )
用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,所有未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變;隨后設(shè)計針對甲基化和非甲基化序列的引物進(jìn)行PCR。通過電泳檢測MSP擴增產(chǎn)物,如果用針對處理后甲基化DNA鏈的引物能得到擴增片段,則說明該位點存在甲基化;反之,說明被檢測的位點不存在甲基化。
客戶需提供 :
組織標(biāo)本或純化好的符合實驗要求的 樣本,檢測的基因信息,相關(guān)文獻(xiàn)等。
*終交付:
實驗報告單,MSP電泳圖/ BSP測序圖等。
免費服務(wù)熱線
400-8705-465