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凝膠遷移實(shí)驗(yàn)（EMSA-electrophoretic mobility shift assay）

來(lái)源: | 作者:3 | 發(fā)布時(shí)間: 1713天前 | 1579 次瀏覽 | 分享到:

凝膠遷移實(shí)驗(yàn)是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù)，可用于定性和定量分析。這一技術(shù)*初用于研究DNA結(jié)合蛋白，目前已用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。

基本原理：

通常將純化的蛋白和細(xì)胞粗提液和32P同位素標(biāo)記的DNA或RNA探針一同保溫，在非變性的聚丙烯凝膠電泳上，分離復(fù)合物和非結(jié)合的探針。DNA-復(fù)合物或RNA-復(fù)合物比非結(jié)合的探針移動(dòng)得慢。當(dāng)檢測(cè)如轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子一類的DNA結(jié)合蛋白，可用純化蛋白，部分純化蛋白，或核細(xì)胞抽提液。

應(yīng)用

（1）研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用；

（2）可用于DNA定性和定量分析；

（3）用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。